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多糖涂敷型正相手性柱使用注意事項
本注意事項適用于如下型號的大賽璐手性色譜柱:
CHIRALPAK AD-3/AD-H/AD
CHIRALCEL OD-3/OD-H/OD
CHIRALCEL OB-H/OB
CHIRALPAK AS-3/AS-H/AS
CHIRALCEL OJ-3/OJ-H/OJ
CHIRALCELN OC
CHIRALPAK AY-3/AY-H
CHIRALCEL 0Z-3/OZ-H
CHIRALCEL OK
CHIRALPAK AZ-3/AZ-H (*1)
CHIRALCELE OX- 3/OX-H
CHIRALCEL OG/OF/OA
*1 CHIRALPAK的O AZ-3/AZ-H不可接觸任何堿性添加劑，在流動相及樣品溶解液中,都不可含有堿性添加劑。
1.本文提到的手性柱均為涂敷型 ,所以很多溶劑(例如乙酸乙酯、二氯甲烷、三lvjia烷、四氫呋喃、甲苯、丙酮、DMF、DMSO和甲基叔丁基醚等等)都會對色譜填料造成不可逆的損傷。凡是說明書中沒有提到的溶劑流動相,請不要使用。
通常情況下,用正己烷，乙醇和異丙醇為流動相;
特殊情況下，可以用到甲醇和乙腈,但是需要充分過渡儀器和手性柱,同時嚴格控制流動相的混合比
例。各手性柱對甲醇乙腈的比例要求不同,請參閱各自的英文版說明書。
2.正相手性柱不能使用水作為流動相， 也不能用水溶解樣品。否則柱子也會受到損傷。
3.大賽璐手性柱zui 大耐壓為30Mpa (300Bar)。為了延長手性柱的使用壽命,建議使用壓力如下:
粒徑10um手性柱:建議8Mpa下使用
粒徑5um手性柱:建議在10Mpa下使用
粒徑3um手性柱:建議在15Mpa下使用
4. 流動相的成分、比例不同,則粘度不同,更換流動相時，需要相應(yīng)地調(diào)整流速,以防止柱壓過高。
在使用前一定要*清洗儀器管路、正確選擇流動相。
1.使用前(在連接該手性柱進行實驗前，請按以下步驟操作):
1.1確認儀器各部件狀態(tài):
校準(zhǔn)各泵的流速看是否準(zhǔn)確。
1.2使用溶劑及配制:
使用的有機溶劑(流動相)均為色譜級。
配制流動相時,請充分振蕩混合均勻,并且超聲排除氣泡。
1.3 樣品的配制:
樣品一般是溶解于流動相中進樣。個別情況下,也可以是正己烷和異丙醇(或乙醇)的等量混合溶劑中。如果使用非流動相溶解樣品，需要特別注意會出現(xiàn)樣品結(jié)晶析出的可能，一般
表現(xiàn)為柱壓升高,峰型不對稱等。
-一般不能使用100%的甲醇或Z腈溶解樣品。其它不能用作流動相的溶劑(例如之酸乙酯、
二氯甲烷、三lvjia烷、四氫呋喃、甲苯、丙酮、DMF、DMSO和甲基叔丁基醚等等)同樣不能用于溶解樣品。若樣品為油狀物，請在配樣前確認樣品里沒有殘留對柱子有損傷性
的有機溶劑,例如乙酸z酯、二氯甲烷、三lvjia烷四氫呋喃和甲基叔丁基醚等。
樣品不能溶解在水中。
1.4溶劑切換:
請在連接色譜柱前，按下述要點*做好溶劑切換
根據(jù)HPLC系統(tǒng)中不同的當(dāng)前流動相,采用不同的沖洗方法清洗所有管路:包括所有溶劑入口、泵、進樣管路與裝置和其他連接管路(用=通代替色譜柱連接流路沖洗色譜系統(tǒng))
如果當(dāng)前流動相是水相流動相(如水乙腈、緩沖液/甲醇),要先用純水*沖洗(約60mL )
以除去其中存在的有機溶劑或緩沖液,然后用100%的異丙醇或乙醇*沖洗(約60 mL)以置換掉純水。接下來,用流動相(通常是正己烷，異丙醇和乙醇;約30mL )沖洗儀器的整個
管路,以置換掉醇。zui后連接上手性柱。
如果當(dāng)前系統(tǒng)是非水流動相(如烷烴類,異丙醇或Z醇)，則可以直接用流動相(通常是正己
烷,異丙醇和乙醇)，沖洗儀器約30mL,然后可以接上柱子。
如果當(dāng)前系統(tǒng)的流動相中含有一些會破壞正相柱的溶劑，如2酸乙酯，二氯甲烷和四氫呋喃
等等),則需要用100%的異丙醇或2醇(約60mL )沖洗儀器的所有管路,以置換掉對柱子有損傷性的溶劑;然后用實驗所需的流動相(通常是正己烷，異丙醇和乙醇;約30mL)過
渡儀器。zui后連接上手性柱。
剛接上手性柱時,不要突然升高至zui大流速,建議先小流速沖洗柱子,再逐漸升高到實驗所需的
流速。
注意:對于管路比較多的HPLC儀器，建議其余未用的流路也必須按照此步驟依次過渡，以
免誤操作時讓其他溶劑進入系統(tǒng),造成嚴重后果。
若實驗所需的流動相不是正己烷、正庚烷、乙醇和異丙醇,而是其它流動相,請使用前仔細
查看說明書或與我們確認。不同的流動相，過渡儀器的步驟不同。
如果在連接手性柱至HPLC儀器之前，不嚴格按照本說明沖洗置換HPLC儀器系統(tǒng)的溶劑 ，
色譜柱有可能在*次進樣之前就被破壞，-般表現(xiàn)為柱壓偏高，柱效嚴重下降:樣品甚至沒有
保留，不能被分離等等。
2. 使用中:
推薦使用保護柱。
3. 使用后:
實驗結(jié)束后,根據(jù)使用的流動相體系,確認是否需要采用溶劑過渡色譜柱,然后按照說明書的保存方法，將色譜柱密封保存。
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